Dans une coloration histologique, on se préoccupe évidemment de la qualité de l’hématoxyline et du contre colorant que ce soit de l’éosine ou le composé phloxine/safran.
Mais la coloration ne sera pas réussie si on n’utilise pas des réactifs accessoires de qualité! Lorsqu’on emploie une hématoxyline régressive, on doit la différencier correctement. Une solution aqueuse faiblement acide, d’acide acétique ou chlorhydrique est habituellement utilisée. L’utilisation d’une solution alcoolique acidifiée, qui procure une différentiation plus douce et progressive donc plus contrôlable est aussi fréquemment employée. De telles solutions sont ainsi offertes a différentes concentrations chez les fournisseurs de réactifs Comme l’étape de de différentiation est critique pour obtenir une belle coloration nucléaire et qu’elle a été soigneusement vérifiée initialement, on ne veut pas qu’une vulgaire erreur dans la dilution puisse la mettre en péril!.
Ainsi il existe des solutions de différentiation du commerce prêtes à l’emploi ou concentrées qui vous procureront l’assurance d’une reproductibilité dans vos teintes de noyaux sans ruiner votre budget.
L’étape suivant de la coloration consiste à exposer les tissus colorés à un réactif légèrement alcalin ce qui permettra de « bleuir » les sections, de les faire passer du rouge au bleu. On a longtemps utilisé l’eau du robinet naturellement alcaline pour cette étape mais la variation du pH de l’eau courante au fur et à mesure des changements de saisons, par exemple lors de la fonte des neiges au printemps, ainsi que l’arrivée de plusieurs réactifs de bleuissement commerciaux ont rendu cette manière de faire plutôt obsolète. Des solutions d’eau de Scott ou des formules de tampons répondent parfaitement à ce besoin tout en procurant une reproductibilité difficile à obtenir en fabriquant ses propres réactifs maison.
En conclusion, si vous ou vos pathologistes n’êtes pas satisfaits de vos colorations, pensez à jeter un œil aux réactifs accessoires!
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