Les colorations hématologiques et l'effet Romanovsky

Le développement des colorations qu’on utilise aujourd’hui quotidiennement c’est produit sur de longues périodes, avec beaucoup d’essais et erreurs, la plupart du temps de manière empirique et grâce à la contribution de bien des chercheurs. Ce n’est jamais aussi vrai que pour les colorations hématologiques des éléments du sang.

Dès le début, on a découvert que l’éosine, un colorant acide colorait les globules rouges d’une teinte rosée ainsi que les granulations acidophiles des globules blancs justement nommés éosinophiles. Il a fallu que, au cours d’une longue quête pour colorer les parasites de la malaria qui a duré bien des années. M. Dimitri Romanovsky découvre qu’en mélangeant un colorant acide à une vieille solution de bleu de méthylène abandonnée sur le comptoir, il obtenait ce qu’il cherchait. 

Mais il a accompli bien plus car ce mélange comprenant maintenant des colorants basiques, produits de l’oxydation du bleu de méthylène soit les Azur A et B. Ceux-ci colorent en effet différemment les structures basiques comme les granulations des leucocytes basophiles, le cytoplasme des neutrophiles et les noyaux. 

Cet heureux mélange éosine-bleu de méthylène oxidé nous offre aujourd’hui cette coloration panoptique avec une seule solution qui colore de manière différentielle tous les éléments sanguins. Un mécanisme additionnel appelé metachromasie fait que les couleurs des colorants peuvent être modifiées par les structures mêmes de composantes colorées. C’est ainsi qu’on retrouve toute une palette de teintes de granulations et d’inclusions qui permettent encore aujourd’hui une excellente différentiation des cellules pour un diagnostic sûr.

De nombreuses variations s’en suivirent, développées par May Grunwald, Wright et Gustav Giemsa. Mais toutes observent le même principe,  soit un mélange d’un colorant acide de type éosine avec un colorant basique contenant une proportion variée d’azur A et B et de bleu de méthylène.

Références :

Une brève histoire des colorants utilisés en microscopie optique : https://www.nirgal.net/microscopie/sub_colorants.html