Comment déterminer si le processus de décalcification est complété?

La décalcification des tissus est un processus essentiel qui permet d’analyser les os, les tissus calcifiés, les dents ou les kystes contenant des dépôts de calcium. En effet le calcium nuit grandement à la coupe de blocs enrobés à la paraffine quand il ne la rend pas tout simplement impossible.

On doit d’abord fixer le tissu pour bien le préserver avant de passer à la décalcification. Il existe une variété de solutions qui permettent d’obtenir ce résultat. Leur sélection se fera parfois en fonction de la vitesse d’exécution, parfois en fonction du tissu analysé. Mais une constante est qu’on recherche une solution qui n’abimera pas les tissus. 

Ça demeure un processus long et fastidieux qui se compte plus en jours qu’en heures. De plus comme les agents décalcifiants sont en général des produits chimiques plutôt agressifs, il vaut mieux en retirer les tissus dès que possible pour éviter les dommages ainsi que certaines modifications aux caractéristiques du tissu, comme ses affinités avec certains colorants. Il est donc primordial de bien déterminer le point final de cette procédure.

Plusieurs méthodes existent et sont utilisées pour se faire;

• Observation : quand il ne se forme plus de bulles dans une solution acide, c’est vraisemblablement terminé. Assez aléatoire et peu précis, c’est une méthode qui requiert une confirmation
• Radiographie du tissu : extrêmement précise, cette méthode est peu pratique à appliquer en routine par l’accès difficile aux instruments et à cause du coût des tests à effectuer.
• Toucher : plutôt imprécise, cette technique, cependant rapide, demande une expertise certaine en plus d’avoir le potentiel d’endommager les tissus
• Piquer : avec une aiguille ou un objet piquant, piquer le tissu en différents endroits. La résistance montre une décalcification incomplète mais cette méthode est clairement traumatisante pour le tissu.
• Couper : à l’aide d’un bistouri, couper le tissu et on analyse les résultats de la même manière qu’en piquant. C’est correct si on doit couper le tissu de toute manière et moins dommageable que l’aiguille car la lame peut laisser une coupure plus nette.
• Flexion & Torsion : franchement… oui ça va donner une idée grossière de la flexibilité du tissu mais vraiment peu scientifique et dommageable pour les tissus.
• Chimique : permet de déterminer s’il reste du calcium dans la solution de décalcification. Avec les bons réactifs, cette méthode précise et facile à faire permet d’obtenir un résultat clair et définitif même avec l’EDTA. En cas de résultats positifs, il suffit de remplacer le liquide de décalcification et de refaire le test au moins trois heures plus tard.

L’histologie fait essentiellement les mêmes choses aujourd’hui qu’il y a 150 ans. Ce qui ne veut pas dire qu’il faille utiliser les techniques d’antan et, lorsque la technologie nous permet d’avancer, il est probablement sage de passer aux nouvelles méthodes contrôlables qui offrent des résultats plus précis et reproductibles.