Lignes directrices de l'ASCO/CAP sur la fixation de tissu du sein, une réelle normalisation ?

Après de nombreux événements où des échantillons de patientes n'ont pas été gérés de manière optimale, des lignes directrices ont été publiées sur la fixation des échantillons de tissu mammaire testés pour l'expression ER/PR/Her2. 

« Les échantillons destinés aux tests ER et PgR sont fixés dans du formol neutre tamponné à 10 % pendant 6 à 72 heures.

Nous sommes tous d'accord pour dire que cette mesure était la bienvenue pour tenter de normaliser la manipulation des tissus. La recommandation a été qualifiée de « forte », ce qui a convaincu de nombreux laboratoires d'abandonner des algorithmes développés localement afin de se conformer aux dites recommandations.

Mais quel est vraiment le degré de standardisation actuel ? Une question évidente serait celle de la composition de FNT non? Quelle est donc cette recette standard à laquelle tous les fabricants doivent se conformer ?

Eh bien, il semble qu'il n'existe tout simplement pas de recette standard. Le manuel (1) auquel je me réfère personnellement indique ce qui suit : 3,7 % de formaldéhyde, et respectivement 0,35 et 0,65 % p/v de phosphate monosodique et disodique. 

Comparons ceci avec les fiches signalétiques des différents fournisseurs nord-américains de FNT. La teneur en formaldéhyde varie de : 3,5-4,0%,  4%, moins de 4%, moins de 6% et secret commercial ! La teneur en méthanol elle passe de moins de 1 % à moins de 2 %, en passant par 1 à 1,5 %. Et si les sels tampons sont similaires, parfois ils sont pas complètement remplacés par leurs composants, l'acide phosphorique et l'hydroxyde de sodium. 

Une solution de FNT à 10% devrait être à 3,7% puisque la formaldéhyde sature à 37%,  et tous les produits n’offrent pas ça de toute évidence.

Chez Chaptec, nous avons développé notre propre recette de FNT que nous avons appelée TissuFix®. Il s'agit d'un fixateur à base de formaldéhyde, tamponné au phosphate ce qui le qualifie comme FNT. Les concentrations des composantes sont, comme pour les autres fabricants, propres à notre recette. (6 % de formaldéhyde et 1,5 à 2 % de méthanol). Et si vous vous informez, vous trouverez quantité de laboratoires qui vous diront que, surtout pour les tissus adipeux, cette formulation fixe plus rapidement, beaucoup plus rapidement que n'importe quelle autre FNT.

L'objectif initial des lignes directrices était que tous les échantillons mammaires soient fixés de manière adéquate.  Cet objectif semble avoir proche malgré le manque de standardisation du réactif lui-même. Ce qui nous amène à postuler que TissuFix® est une formulation de FNT parfaitement acceptable pour la fixation des tissus mammaires et probablement plus efficace que les autres FNT, dans ce monde très peu normalisé ! Maintenant, pourquoi vous fier à notre opinion? Découvrez-le par vous-même et demandez votre échantillon maintenant. 

*Histotechnologie, théorie et procédés, 2e édition, Jacques C. Fortier & René Hould

1. Pourquoi des lignes directrices ont-elles été publiées concernant la fixation des tissus mammaires pour les tests ER/PR/Her2 ?

Parce qu'il y avait de nombreux cas où les échantillons n’étaient pas correctement fixés, ce qui compromettait la fiabilité des résultats. Les lignes directrices visent donc à standardiser la fixation.

2. Que recommandent ces lignes directrices ?

Que les échantillons destinés aux tests ER et PgR soient fixés dans du formol neutre tamponné à 10 % (FNT)pendant 6 à 72 heures.

3. Cette recommandation a-t-elle eu un impact réel dans les laboratoires ?

Oui. La recommandation a été qualifiée de « forte », ce qui a poussé de nombreux laboratoires à abandonner leurs propres protocoles locaux pour se conformer à ces directives.

4. Existe-t-il une recette standardisée du FNT à 10 % ?

Non. Malgré son utilisation très répandue, il n’existe pas une seule formulation standard à laquelle tous les fabricants se conforment.

5. Quelle est la formulation de FNT proposée par Chaptec ?

Chaptec offre TissuFix®, un FNT caractérisé par :

6 % de formaldéhyde
1,5 à 2 % de méthanol
Un tampon phosphaté

6. Quels sont les avantages observés avec TissuFix® ?

Selon plusieurs laboratoires utilisateurs :

Fixation plus rapide, particulièrement dans les tissus adipeux
Résultats comparables ou supérieurs aux autres FNT
Reproductibilité dans le contexte des tests ER/PR/Her2

7. Si les formulations diffèrent, l’objectif des lignes directrices est-il tout de même atteint ?

Oui. Malgré l’absence de standardisation totale, l’objectif — assurer une fixation adéquate des tissus mammaires — semble être atteint dans la majorité des cas, incluant avec TissuFix®.

8. Comment appliquer les lignes directrices sur la fixation des tissus mammaires?

Puisque plusieurs formulations de FNT coexistent et donnent de bons résultats, TissuFix® constitue une alternative parfaitement acceptable et performante, et mérite d’être testée en laboratoire.